早期高压氧治疗对急性脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶的影响及疗效评价

摘要：目的 探讨早期高压氧(HBO)治疗对急性脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性表达变化的影响及疗效评价.方法 选取70只健康SD大鼠按随机数字表法分为对照组、假手术组、SCI组、HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组,每组10例.将SCI组、HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组大鼠均采用改良的Allen法制成T8～T9急性脊髓损伤模型(打击后大鼠尾部痉挛摆动、双侧下肢瘫痪,诱发电位测定值明显异于对照组,表明制模成功);假手术组只进行硬膜囊暴露手术但不打击损伤脊髓;对照组不做任何处理.对照组、假手术组和SCI组仅饲养不做高压氧处理;HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6h组和HBO 8 h组分别在制模成功后2、4、6和8h始置于动物实验纯氧舱内行高压氧治疗,每日1次,连续7d.分别于制模成功时和高压氧治疗完成时2个时间点,采用Gale等建立的联合行为评分(CBS)法对各个损伤组大鼠后肢功能进行神经学评定,使用神经肌电图机检测运动诱发电位(MEP)评价大鼠肢体功能.在HBO治疗结束后24 h内处死所有大鼠取材,取材后用重氮比色法测定iNOS表达量,用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量.将所得数据进行统计学分析比较.结果 SCI组、HBO 2 h组和HBO 4 h组在实验期间各死亡1只,余67只大鼠纳入结果分析.①治疗结束后,脊髓损伤的大鼠脊髓组织中iNOS检测显示,SCI组iNOS测定值为(O.64±0.13)U/L,表达量高;iNOS表达量逐渐明显降低,以HBO 8 h组为明显(P＜0.05),HBO 8 h组iNOS值为(0.36 ±0.10) U/L,表达量低,且与其它各组间差异有统计学意义(P＜0.05);但脊髓损伤各组大鼠的iNOS值仍高于假手术组的(0.33±0.07)U/L和对照组的0 U/L,且组间差异均有统计学意义(P＜0.05).②HBO治疗结束后,对照组、假手术组和SCI组大鼠血清中NO的测定量分别为(6.52±4.17)、(48.36 ±8.49)和(105.68±13.12) mmol/L;经HBO治疗后大鼠NO生成量明显降低,以HBO 8 h组为明显,HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组大鼠血清NO的测定量分别为(89.25 ±12.82)、(66.53 ±17.91)、(41.33±15.59)和(33.14±11.21) mmol/L,均低于SCI组(P＜0.05);且与假手术组比较,组间差异亦均有统计学意义(P＜0.05).③与对照组及其它HBO治疗组比较,HBO治疗各组大鼠的CBS评分百分比均有提高(P＜0.05),运动功能逐渐恢复良好,以HBO 8 h组为明显,且组间差异均有统计学意义(P＜0.05).④除对照组和假手术组外,其余各组脊髓损伤大鼠治疗前、后MEP检测的潜伏期和波幅组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠急性脊髓损伤后8h开始高压氧治疗与损伤后2、4和6h开始高压氧治疗相比,在减少iNOS的合成和促进运动功能恢复方面有更明显的作用.